2022-07-11 17:43:56
Использование на клеточных моделях in vitro предпочтительнее, чем in vivo (внутри живого организма), так как это согласуется с биоэтической концепцией трех R:
–
Replacement — замена или отказ от использования животных;
–
Reduction — уменьшение количества животных до необходимого и достаточного уровня;
–
Refinement — улучшение условий проведения экспериментов при использовании животных.
Наиболее известны следующие варианты получения клеточных моделей заболеваний in vitro:
–
Использование клеток человека с необходимым заболеванием, которые уже имеют нужный генотип. Это особенно актуально, если патогенез до конца неизвестен или имеет множественные мутации. Выделенные клетки часто переводят в индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (способные к переходу в другие типы тканей) или проводят их иммортализацию (способность к делению неограниченное количество раз) и культивируют в 2D-формате в виде монослоя на пластиковой поверхности. Например, такой путь используют при моделировании болезни Альцгеймера.
–
Использование в качестве основы известных клеточных линий человеческого происхождения, чаще всего в 2D-формате. Далее проводят редактирование генома с помощью систем CRISPR/Cas9, ZFN и TALEN или их переход в нужные ткани. Например, при моделировании болезни Паркинсона используют клетки человеческой нейробластомы SH-SY5Y, которые переводят в дофаминергические нейроны.
–
Использование опухолевых клеток для воссоздания онкологических заболеваний. В таком случае часто используют более сложные системы, которые культивируют в формате 3D-культур, то есть с использованием искусственной матрицы, имитирующей естественную среду клеток и обеспечивающей межклеточные контакты.
Создание клеточных моделей заболеваний in vitro значительно упрощает процесс поиска и разработки терапевтических агентов, а также мониторинга качества лекарственных препаратов на всех этапах их производства.
1.8K viewsedited 14:43
B
